2025-08-14
摘要
本品為不同品類的茶葉中的氨基酸，使用Biochrom30+全自動(dòng)氨基酸分析儀，對(duì)其所含的氨基酸組分及含量進(jìn)行酸水解并分析測(cè)定。結(jié)果表明該未知樣中氨基酸各單個(gè)氨基酸含量的濃度見附頁結(jié)果表。其中樣01氨基酸總含量為29.103 umol/mL，02氨基酸總含量為28.806 umol/mL，03氨基酸總含量為30.371 umol/mL。由譜圖測(cè)試過程中可知，其茶葉中還含有其他種類的氨基酸，所以再茶品類的檢測(cè)中，使用包含檢測(cè)項(xiàng)目更多的生理體液系統(tǒng)會(huì)更全面，準(zhǔn)確。
一、樣品前處理
1、 所用試劑
1.1 Loading Buffer：鈉鹽系統(tǒng)，pH 2.2
1.2 濃鹽酸，濃度≥36%,優(yōu)級(jí)純
1.3 6mol/L 鹽酸：取500mL 鹽酸加水稀釋至1000mL,混勻
1.4 水：去離子水
1.5 17種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品
2、前處理設(shè)備
1）分析天平:精度為 0.0001g
2）移液槍及槍頭
3）一次性注射器及0.22um濾膜
4）低范圍pH試紙
5）真空干燥烘箱
6）無油真空泵
7）電熱平板及稱量瓶
3、樣品制備（參考GB 5009.124-2016食品中氨基酸的測(cè)定）
移液槍準(zhǔn)確移取試樣1mL，加入水解管中，加入10mL 6mol/L鹽酸(1.3)，冷凍3min?5min,接到真空泵的抽氣管上,抽真空(接近0Pa),然后充入氮?dú)?重復(fù)抽真空-充入氮?dú)獠襟E3次后,在充氮?dú)鉅顟B(tài)下擰緊螺蓋。 將水解管放入真空干燥箱中，110°C水解22-24h，冷卻、混勻、開管、轉(zhuǎn)移并定容到50ml容量瓶中，用移液槍取適量水解液于稱量瓶中，在電熱平板上60℃濃縮至干，必要時(shí)加入少許水(1.4)，重復(fù)蒸干1-2次，加入適量PH2.2的稀釋上機(jī)用檸檬酸鈉緩沖液溶解(1.1),振蕩混勻后,吸取溶液通過0.22 μm 濾膜后,轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶,為樣品測(cè)定液,供儀器測(cè)定用。
二、分析方法描述（Biochrom 30+）
氨基酸分析儀分析方法參數(shù)：
1）色譜柱：Biochrom Na型陽離子交換樹脂柱，4.6x20cm
2）分離程序：
運(yùn)行時(shí)間：經(jīng)分析時(shí)間+再生時(shí)間 60.15min
3）反應(yīng)單元溫度：135°C
4）檢測(cè)波長(zhǎng)：570nm、440nm同時(shí)檢測(cè)
三、樣品中氨基酸含量的計(jì)算
樣品測(cè)定液氨基酸的含量按式（1）計(jì)算:
Ci = Cs/As × Ai× F ………………（1）式中:
Ci ——樣品測(cè)定液氨基酸i的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);
Cs ——氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作液氨基酸s的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);
Ai ——試樣測(cè)定液氨基酸i的峰面積;
As ——氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作液氨基酸s的峰面積;
F ——樣品稀釋倍數(shù)。
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